产品名称:16HBE人支气,管上皮细胞、16HBE人支气,管上皮细胞、16HBE人支气,管上皮细胞、16HBE人支气,管上皮细胞、16HBE人支气,管上皮细胞产品基本信息 细胞名称:16HBE,人支气,管上皮细胞 种属来源:人 组织来源:支气,管 细胞形态:上皮细胞样 生长特性:贴壁生长 培养基::90%RPMI-1640+10%FBS 生长条件:气相:95%空气+5%二氧化碳;温度:37℃ 传代方法:1:2至1:3,每周 3次 冻存条件:无血清冻存液,液氮储存 支原体检测:无 细胞培养操作 1)复苏细胞:将含有1 mL细胞悬液的冻存管在 37℃水浴中迅速摇晃解冻,加4 mL培养基混合均匀。在1000 rpm条件下离心3 min,弃去上清液,加1-2 mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入含适量培养基的培养瓶中培养过夜(或将细胞悬液加入10 cm皿中,加入约8 mL培养基,培养过夜)。 天换液并检查细胞密度。 2)细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。 a、弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。 b、加1 mL消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,使消化液浸润所有细胞,弃去消化液,将培养瓶置于37℃培养箱中消化1 min,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。 c、按6-8 mL/瓶补加培养基,轻轻打匀后装入无菌离心管中,1000 rpm离心4 min,弃去上清液,补加1-2 mL培养液后吹匀。 d、将细胞悬液按1:2比例分到新的含8 mL培养基的新皿中或者瓶中,置于培养箱中培养。 3)细胞冻存:待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。下面 T25 瓶为例; a、收集细胞及细胞培养液,装入无菌离心管中,1000 rpm条件下离心4 min,弃去上清液,用PBS清洗一遍,弃尽PBS,加 1 mL血清重悬细胞,进行细胞计数。 b、根据细胞数量加入无血清细胞冻存液,使细胞密度5×106~1×107/mL,轻轻混匀,每支冻存管冻存1mL细胞悬液,注意冻存管做好标识。 c、将冻存管放入-80℃冰箱,24 h后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。

metabolic profiles when compared with their wild-type counterparts, which in Treg respond to increased c-Myc-induced glycolysis [52, 55]. Consequently, mice bearing

macroautophagy-incompetent CD8+ T-cells generate deficient CD8+ T-cell memory, while    those where deletion of Atg7or Atg5occurs in Foxp3+ T-cells show decreased Treg stability and survival [52, 55]. Interestingly, T-cells lacking Rab7, a small GTPase that promotes   Eur JImmunol. Author manuscript; available in PMC 2017 June 01.