上海富雨生物科技有限公司
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HEPARG 人肝癌细胞
  • 品牌:上海富雨
  • 产地:进口/国产
  • 货号:WM-23XM134
  • 价格: ¥1600/株
  • 发布日期: 2024-04-13
  • 更新日期: 2024-11-12
产品详请
产地 进口/国产
保存条件 低温冷藏
品牌 上海富雨
货号 WM-23XM134
用途 科研
组织来源
细胞形态 见详情
是否是肿瘤细胞 见详情
保质期 见详情
器官来源 见详情
免疫类型 见详情
品系 见详情
生长状态 见详情
物种来源 见详情
包装规格 1×10?cells/T25或1mL冻存管
是否进口
产品名称:HEPARG 人肝癌细胞、HEPARG 人肝癌细胞、HEPARG 人肝癌细胞、HEPARG 人肝癌细胞、HEPARG 人肝癌细胞产品基本信息 细胞名称:HEPARG,人肝癌细胞 种属来源:人 组织来源:肝脏 细胞形态:上皮细胞样 生长特性:贴壁生长 培养基:: 生长条件:气相:95%空气+5%二氧化碳;温度:37℃ 传代方法:1:2至1:3,每周 3次 冻存条件:无血清冻存液,液氮储存 支原体检测:无 细胞培养操作 1)复苏细胞:将含有1 mL细胞悬液的冻存管在 37℃水浴中迅速摇晃解冻,加4 mL培养基混合均匀。在1000 rpm条件下离心3 min,弃去上清液,加1-2 mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入含适量培养基的培养瓶中培养过夜(或将细胞悬液加入10 cm皿中,加入约8 mL培养基,培养过夜)。第二天换液并检查细胞密度。 2)细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。 a、弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。 b、加1 mL消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,使消化液浸润所有细胞,弃去消化液,将培养瓶置于37℃培养箱中消化1 min,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。 c、按6-8 mL/瓶补加培养基,轻轻打匀后装入无菌离心管中,1000 rpm离心4 min,弃去上清液,补加1-2 mL培养液后吹匀。 d、将细胞悬液按1:2比例分到新的含8 mL培养基的新皿中或者瓶中,置于培养箱中培养。 3)细胞冻存:待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。下面 T25 瓶为例; a、收集细胞及细胞培养液,装入无菌离心管中,1000 rpm条件下离心4 min,弃去上清液,用PBS清洗一遍,弃尽PBS,加 1 mL血清重悬细胞,进行细胞计数。 b、根据细胞数量加入无血清细胞冻存液,使细胞密度5×106~1×107/mL,轻轻混匀,每支冻存管冻存1mL细胞悬液,注意冻存管做好标识。 c、将冻存管放入-80℃冰箱,24 h后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。
 



    南京万木春生物科技有限公司(Najing Wanmuchun Biotechnology  Co., Ltd)面向国内外市场专业研发、生产和销售细胞、 外泌体、ELISA 试剂盒、 抗体、重组蛋白及相关试剂。产品在免疫学、信号转导、代谢、 神经科学等领域内都有最前沿科学文献发表,被国内外多所大学、研究机构和药学平台使用并发表文献多达1000多次。公司凭借优异的产品和完善的服务 体系现已受到广大国内外用户的青睐和认可。
品牌优势
1、产品优势:产品具有高特异性、回收率高、线性好、变异系数低、稳定性好;
2、质量保证:产品质量稳定,每批次产品必须通过 QA、QC 检测才可出库;
3、实力强大: 标准实验室、研发中心,动物房 ;
4、技术支持:技术部 5*8 小时技术问题及时解答;
5、服务周到:发货及时,三个工作日顺丰快递;售后无忧,包退包换。
6、研发、生产科研产品:ELISA 试剂盒:人、大小鼠、牛、兔、山羊、仓鼠、猪、马、鸡、犬、豚鼠、猴、绵羊多种属1000多种指标;
抗体:兔多抗、鼠单抗种类丰富,一抗 1 万余种,二抗 100 多种;
重组蛋白:多项发明专利,原核表达系统稳定表达蛋白 1000 余种。

                                         
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常温细胞收货当天处理方式
 
1.收到常温细胞后,及时拍照记录有无漏液/瓶身破损现象。
2.镜下观察有无微生物污染现象,拍照记录不同倍数镜下细胞状态和有无染菌现象,方便后续售后处理。
3.用 75%酒精擦拭瓶身,置于培养箱中静置培养 2~4h 后进行传代操作。
4.观察细胞密度若超过 80%则可正常传代处理(有的原代细胞不可传代,请根据实际情况决定),首次传代推荐比例 1:2 到 1:3(按实际收货细胞密度决定,若不确定可联系技术支持);若细胞密度不到 80%则可取出部分培养基留 6ml 左右原瓶培养 基继续培养,注意拧松瓶盖或更换透气瓶盖;悬浮细胞注意离心所有培养基以收集细胞。
5.由于气温,运输等影响造成贴壁细胞漂浮的,请将细胞离心收集后在离心管中消化后进行传代(参考附件),或及时联系技术支持进行指导传代。
6.若观察到异常或者对细胞有疑问,请及时跟代理商或者我们联系;对于细胞培养操 作及培养注意事项有疑问的,可跟我们的技术支持交流。
附:收到贴壁细胞漂浮处理方法(部分细胞由于贴壁松散,会出现运输后漂浮,冬天气温低时也会出现细胞收缩漂浮,属于不可避免因素,正确处理后都可以正常生长)
1、将培养瓶内所有培养基转入无菌离心管,离心收集细胞(1200rpm 3min)去除 旧培养基;
2、用 PBS 重悬细胞,将所有细胞收集到一个离心管中,再次离心(1200rpm 3min)去除 PBS;
3、加入 1ml 左右 0.25%胰酶重悬细胞,混匀即可,不能吹打太多次,放入培养箱消化细胞,根据细胞特性决定消化时间(TM3、TM4、293 系列约 1~2 分 钟);
4、消化好后,用移液枪轻轻吹打细胞悬液,使细胞团分散,迅速加入 3-5ml 含 血清的培 养基混匀以终止消化,离心(1200rpm 3min)去除胰酶;
5、加入 5ml 左右的细胞相应的完全培养基混匀,按比例接入无菌培养瓶/皿中;
6、显微镜下观察看细胞是否成均匀分散的单颗细胞,若有 3-5 个成团的小细胞团可不用重新消化,使之贴壁后待细胞生长稳定后再消散细胞。
 
贴壁细胞传代
 
1. 从培养容器中吸出用过的细胞培养基并丢弃;
2. 用不含钙、镁的平衡盐溶液冲洗细胞(每10cm 2培养表面积约2mL溶液);从与贴壁细胞层相对的容器一侧轻轻加入冲洗液,以避免搅动细胞层,前后摇晃容器数次(注:冲洗步骤可去除可能抑制解离剂作用的少量
血清、钙和镁);
3. 从培养容器中吸出冲洗液并丢弃,向培养瓶中加入预热的解离剂;试剂量应足以覆盖细胞层(每10cm 2大约0.5mL);
4. 轻轻摇晃容器,使试剂完全覆盖细胞层;吸出多余解离试剂,T25 细胞培养瓶留 200ul 左右即可;
5. 将培养容器在室温下孵育约 2分钟(请注意实际孵育时间根据所用细胞不同而有所差异);
6. 在显微镜下观察细胞解离情况;如果解离程度未达 90%,可将孵育时间 延长几分钟,30 秒钟检查一次解离情况;也可轻轻拍打培养容器以加快细胞解离;
7. 细胞解离程度大于等于 90%时,倾斜培养容器,使细胞上液体尽快流尽;加入所用解离剂两倍体积的预热完全生长培养基;吹打细胞层表面数次,使培养基分散;
8. 将细胞转移到15mL 无菌离心管中,200×g 的离心力离心 3-5 分钟 (请注意离心速度和时间依细胞种类不同而有所差异);
9. 用最少体积的预热完全生长培养基重新悬浮细胞沉淀,将细胞悬液按照 推荐比例稀释,并将适量体积的细胞悬液转移到新的细胞培养容器中,把细胞放回培养箱(注:如果使用培养瓶,将其放入培养箱前应将瓶盖旋松,以便进行充分的气体交换,除非您使用的是通气式培养瓶和透气性瓶盖)。