产品名称:HFL-1人肺成纤,维细胞(附STR鉴定报告)、HFL-1人肺成纤,维细胞(附STR鉴定报告)、HFL-1人肺成纤,维细胞(附STR鉴定报告)、HFL-1人肺成纤,维细胞(附STR鉴定报告)、HFL-1人肺成纤,维细胞(附STR鉴定报告)细胞介绍 该细胞为稳定二倍体细胞。 ? 细胞特性 1)来源:肺 2)形态:成纤维细胞样,贴壁生长 3)含量:>1x10 6 个/mL 4)污染:支原体、细菌、酵母和真菌检测为阴性 5)规格:T25瓶或者1mL冻存管包装 ? 运输和保存:使用含有优质胎牛血清的2ml冻存管发送存活细胞。收到细胞后,可在1000RPM,常温条件下,离心5min后,于洁净操作台弃去上清,加入推荐使用的培养基后转移至10cm培养皿或者T75培养瓶中培养,传代达到细胞生长状态良好时,再进行冻存。具体操作见细胞培养步骤。 ? 细胞用途:仅供科研使用。 ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? 细胞培养步骤 一.培养基及培养冻存条件准备: 1)准备F-12K 培养基(F-12K :GIBCO,货号:21127-022),80%;优质胎牛血清,20%。 2)培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37摄氏度,培养箱湿度为70%-80%。 3)冻存液:90%完全培养基,10%DMSO,现用现配。液氮储存。 二.细胞处理: 1)复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻,加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜(或将细胞悬液加入10cm皿中,加入约8ml培养基,培养过夜)。第二天换液并检查细胞密度。 2)细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。 对于贴壁细胞,传代可参考以下方法: 1.弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。 2.加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。 3.按6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。 4.将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。 3)细胞冻存:待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。贴壁细胞冻存时,弃去培养基后加入少量胰酶,细胞变圆脱落后,加入约1ml含血清的培养基后加入冻存管中,再添加10%DMSO后进行冻存。

Autophagy and T-cell immunosenescence

Age is the single largest risk factor for many major diseases in humans. As with other tissues and organs, the immune system’s function also declines with age. The age-associated

changes in the T-cell compartment are primarily responsible for the defective adaptive

immune responses that are characteristic of the elderly, and result in decreased efficiency of  Eur JImmunol. Author manuscript; available in PMC 2017 June 01.