上海富雨生物科技有限公司
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GC-1 spg小鼠精原细胞系
  • 品牌:上海富雨
  • 产地:进口/国产
  • 型号:1×10?cells/T25或1mL冻存管
  • 货号:WM-23XM252
  • 价格: ¥1200/株
  • 发布日期: 2024-04-13
  • 更新日期: 2024-11-12
产品详请
产地 进口/国产
保存条件 低温冷藏
品牌 上海富雨
货号 WM-23XM252
用途 科研
组织来源 睾丸
细胞形态 见详情
是否是肿瘤细胞
保质期 见详情
器官来源 见详情
免疫类型 见详情
品系 见详情
生长状态 见详情
物种来源 见详情
包装规格 1×10?cells/T25或1mL冻存管
是否进口
产品名称:GC-1 spg小鼠精原细胞系、GC-1 spg小鼠精原细胞系、GC-1 spg小鼠精原细胞系、GC-1 spg小鼠精原细胞系、GC-1 spg小鼠精原细胞系细胞介绍 该细胞是B型精原细胞通过转染pSV3-neo(含有SV40大T抗原和新霉素耐药编码序列的质粒)而产生的永生化,细胞表达两种睾丸特异性异蛋白,细胞色素c和乳酸脱氢酶C4。 细胞特性 1)来源:睾丸 2)形态:神经元 3)?含量:>1x106 个/mL 4)?污染:支原体、细菌、酵母和真菌检测为阴性 5)?规格:T25瓶或者1mL冻存管包装 运输和保存 可选择干冰运输及发送复苏存活细胞方式 (1)干冰运输,收到后立即转入液氮冻存或直接复苏; (2)存活细胞,收到后应继续生长,传代达到细胞生长状态良好时,再进行冻存。具体操作见细胞培养步骤。 ?(3)收到细胞后请拍照,3天内如果发现污染,请及时拍照与我们联系。 细胞用途: 仅供科研使用。 细胞接收后的处理 1)?收到细胞后,请检查是否漏液,如果漏液,请拍照片发给我们。 2)?请先在显微镜下确认细胞生长状态,去掉封口膜并将T25瓶置于37℃培养约2-3h。 3)?弃去T25瓶中的培养基,添加6ml新的完全培养基。 4)?如果细胞长满(90%以上)请及时进行细胞传代。 5)??接到细胞次日,请检查细胞是否污染,若发现污染或疑似污染,请及时与我们取得联系。 细胞培养步骤 一.培养基及培养冻存条件准备 1)?准备DMEM(GIBCO,货号12800017,添加NaHCO3 1.5g/L),培养基;北美胎牛血清,10%;双抗,1%; 2)?培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37摄氏度,培养箱湿度为70%-80%。 3)?冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配。 二.?细胞处理: 1)?复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻,加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜(或将细胞悬液加入250px皿中,加入约8ml培养基,培养过夜)。第二天换液并检查细胞密度。 2)?细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。 对于贴壁细胞,传代可参考以下方法: 1.?弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。 2.?加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。 3.?按6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。 4.?将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。 细胞冻存:待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。 下面T25瓶为例; 1.细胞冻存时,弃去培养基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml胰酶,细胞变圆脱落后,加入2ml完全培养基终止消化,可使用血球计数板计数。 2.1000RPM离心5分钟去掉上清。用血清重悬浮,加DMSO至最终浓度为10%。加入DMSO后迅速混匀,按每1ml的数量分配到冻存管中,注意冻存管做好标识。本公司按每个冻存管细胞数目大于1X106个细胞冻存。 3.将冻存管置于程序降温盒中,放入-80度冰箱,至少2个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。 培养细胞时请注意 (1)传代时细胞的接种密度应控制在 1万-4万 活细胞/平方厘米。 (2)选用高质量的胎牛血清配制培养液。