人结-肠-癌细胞HCT-116


种属 人
别称 HCT-116; HCT.116; HCT_116; HCT116; CoCL2
组织来源 结-肠
疾-病 结直肠-癌
传代比例/细胞消化 1:2-1:3传代 ,消化1-2分钟 ,
完全培养基配置 McCoy’s 5A 培养基;10%胎牛血清;1%双抗
简介 HCT116是1979年M.Brattain等从患结-肠-癌的男性- 中分离的三株恶性细胞之一。在半固体琼脂糖培养基中形成克 隆。HCT116在无胸腺的裸鼠有致-瘤性 ,形成上皮样的肿-瘤
形态 上皮细胞样
生长特征 贴壁生长
倍增时间 ~48h
基因表达 carcinoembryonic antigen (CEA) 1 ng per 1×10^6 cells per 10 days
致-瘤性 Yes, in nude mice
STR Amelogenin:X ,Y;CSF1PO:7 ,10;D13S317:10 ,12;D16S539:11 ,13;D18S51:16 ,17;
D19S433:12 ,13;D21S11:29 ,30;D2S1338:16;D3S1358:12 ,18 ,19;D5S818:10 ,11;
D7S820:11 ,12;D8S1179:12 ,14;FGA:18 ,23;TH01:8 ,9;TPOX:8;vWA:17 ,22;
培养条件 气相 :空气 ,95% ;二氧化碳 ,5%。 温度 :37摄氏度 ,培养箱湿度为70%-80%。
冻存条件 冻存液 :90%FBS ,DMSO 10%,
或使用非程序冻存液 : 货号JY-H040
保藏机构 ATCC; CCL-247
产品使用 于科学研究 ,不可作为动物或人类疾-病的产品使用。

细胞接收处理流程 :
1:观察有无破损漏液情况 ,如有请拍照及时联系客服。
2:酒精消毒培养瓶表面后显微镜下观察细胞状态 ,观察拍照后不用打开培养瓶盖 放入培养箱静
止2-3小时稳定 细胞状态。
3:请按照细胞操作指南进行 次传代冻存处理。
4:产品随货会附带细胞说明书、细胞培养操作指南、细胞鉴定、支原体检测报告。
5:若产品有异常或其他疑问 ,可随时联系客服;转至技术支持。

常温细胞收货当天处理方式
1. 收到常温细胞后,及时拍照记录有无漏液/瓶身破损现象。
2. 镜下观察有无微生物污染现象,拍照记录不同倍数镜下细胞状态和有无染菌现象, 方便后续
售后处理。
3. 消毒后,更换赠送的完全培养液放置培养箱静止2-3小时。如细胞有多数悬浮细胞需要离心收集 重新接种止培养瓶。
4. 观察细胞密度若超过 80%则可正常传代处理(有的原代细胞不可传代,请根据实际情况决定),
传代推荐比例 1:2 到 1:3(按实际收货细胞密度决定,若不确定 可联系技术支持);若细 胞密度不到 80%则可继续培养,注意拧松瓶盖或更换透气瓶盖;悬浮细胞注意离心所有培养基以收 集细胞。
5. 由于气温,运输等影响造成贴壁细胞漂浮的,请将细胞离心收集后在离心管中消化后进行传代 (参考附件),或及时联系技术支持进行指导传代。

贴壁细胞传代:1.从培养容器中吸出用过的细胞培养基并丢弃;
2.从与贴壁细胞层相对的容器一侧轻轻加入冲洗液以避免搅动细胞层,前后摇晃容器数次
3. 从培养容器中吸出冲洗液并丢弃,向培养瓶中加入预热的胰酶;胰酶量应足以覆盖细胞层 (T25为1ml);
4.将培养容器在室温下孵育约 2分钟(请注意实际孵育时间根据所用细胞系不同而有所差异);
5.在显微镜下观察细胞解离情况;如果解离程度未达 90%,可将孵育时间延长几分钟,每 30 秒 钟检查一次解离情况;
6.细胞解离程度大于等于 90%时,倾斜培养容器,使细胞上液体尽快流尽;加入所用解离剂两倍 体积的预热完全生长培养基;吹打细胞层表面数次,使培养基分散;
7.将细胞转移到15mL 无菌离心管中,以 200×g 的离心力离心 3-5 分钟
(请注意离心速度和时间依细胞种类不同而有所差异);
8.用最少体积的预热完全生长培养基重新悬浮细胞沉淀,将细胞悬液按照推荐比例稀释,并将适 量体积的细胞悬液转移到新的细胞培养容器中,把细胞放回培养箱(注:如果使用培养瓶,将其放 入培养箱前应将瓶盖旋松,以便进行充分的气体交换,除非您使用的是通气式培养瓶和透气性瓶盖)。
悬浮细胞传代:1.将 T25 培养瓶中的悬液收集至离心管中 1000rpm 离心 5min,收集上清,加 1- 2ml 完全培养基重悬,按 1:2 比例进行比例传代分到新T25瓶中,补充5-8ml/瓶新的完全培养基 , 放入细胞培养箱中培养。